免疫組化 分子病理 實驗服務 免疫組化雙染（芯片）免疫組化 分子病理 實驗服務 價格￥300單位張貨號HKF2026品牌浩克 QQ53383090 咨詢購買 產品介紹產品參數資料下載 【產品信息】 產品名稱產品貨號規(guī)格價格免疫組化雙染（芯片）HKF2026張300元實驗原理免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(IHC)或免疫細胞化學技術(ICC)。?實驗步驟1.?石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min?-無水乙醇Ⅰ6min-?95%酒精6min- 85%酒精6min，自來水洗2min。2.?抗原修復：組織切片置于盛滿抗原修復液EDTA(9.0)的修復盒中于微波爐內進行抗原修復，中火8min至沸騰停火8min再轉中低火7min，此過程中應防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。3.?阻斷內源性過氧化物酶：切片加上3%的雙氧水，室溫孵育25min，將玻片置PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。4.?畫圈：用組化專用的組化筆沿著組織外圍輪廓畫一個與組織間隔3-4毫米的小圈，然后加入足量的PBS保證后續(xù)依次加入的封閉血清，一抗，二抗，以及顯色劑能完全覆蓋組織，而不沿著玻片流走。5.?血清封閉:在組化圈內滴加3%BSA?均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。6.?加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗，切片平放于濕盒4°過夜孵育。7.?加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加與超敏兔鼠通用二抗（HRP標記）覆蓋組織，室溫孵育50min。8.?顯色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加解凍的TY反應液反應20min，然后PBS洗三次，之后加入紅色顯色液工作液（PB:CU:紅色色原：AC=860:40:1:100），顯微鏡下控制顯色時間，陽性為紅色，純水沖洗切片終止顯色。(時間較長15min左右)，再重復2-7的操作步驟。9.?抗原修復：組織切片置于盛滿抗原修復液EDTA(9.0)的修復盒中于微波爐內進行抗原修復，中火8min至沸騰?；?br>8min再轉中低火7min，此過程中應防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。10.?阻斷內源性過氧化物酶：切片加上3%的雙氧水，室溫孵育25min，將玻片置PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。11.?畫圈：用組化專用的組化筆沿著組織外圍輪廓畫一個與組織間隔3-4毫米的小圈，然后加入足量的PBS保證后續(xù)依次加入的封閉血清，一抗，二抗，以及顯色劑能完全覆蓋組織，而不沿著玻片流走。12.?血清封閉:在組化圈內滴加3%BSA?均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。13.?加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗，切片平放于濕盒4°過夜孵育。14.?加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加與超敏兔鼠通用二抗（HRP標記）覆蓋組織，室溫孵育50min。15.?DAB顯色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加（稀釋液和濃縮液1000:50配制）新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下控制顯色時間，陽性為棕黃色，純水沖洗切片終止顯色。16.?復染細胞核：蘇木素染色2-3mins左右，自來水洗，蘇木素分化液分化2秒，自來水沖洗，蘇木素返藍液返藍15-30s，流水沖洗。17.?脫水封片：將切片依次放入75%酒精5min-85%酒精5min -95%酒精5min -無水乙醇5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min 中脫水透明，將切片從二甲苯拿出來稍晾干，中性樹膠封片。18.?顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。結果判讀：蘇木素染出細胞核為藍色，DAB顯出的陽性表達為棕黃色，紅色顯色試劑呈粉紅色注意事項：1．注意切片脫蠟是否徹底；2．實驗過程中切片勿干片；3. ? 實驗操作中小心槍頭掛傷組織。 無 暫無 說明文檔下載說明書.pdf 上一篇: IF+TUNEL雙染下一篇: IHC+普魯士藍（或其他化學染料） 推薦 Trap染色 2024年5月22日 3505 【產品信息】 骨組織切片及trap染色實驗步驟 石蠟切片脫蠟至水→工作液配制→孵育染色→蘇木素染色→脫水封片→顯微鏡鏡檢，圖像采集分析 無 暫無 查看全文 siRNA三保一套餐 2024年9月9日 3133 服務介紹： 客戶僅需提供物種以及基因名稱即可 無 暫無 查看全文 miRNA檢測 2024年12月4日 1802 服務介紹： 熒光定量PCR是通過熒光染料(SYBR Green)或熒光標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應過程，結合相應的軟... 查看全文 EDU染色 2023年7月5日 2187 EdU（5-Ethynyl-2’- deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復制的DNA分子中，通過基于EdU... 查看全文
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